細胞培養(yǎng)-RCCS算轉(zhuǎn)三維-細胞培養(yǎng)污染
rccs三維旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)系統(tǒng)的初始轉(zhuǎn)速設(shè)定多少比較好?
rccs三維旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)系統(tǒng)的初始轉(zhuǎn)速設(shè)定多少比較好?
初始轉(zhuǎn)速設(shè)定多少比較適宜?這個問題不是一次遇到,但是,因為細胞培養(yǎng)過程的復(fù)雜程度以及培養(yǎng)環(huán)境、影響因素較多,細胞培養(yǎng)步驟,所以無法給與準確的,一般建議初始轉(zhuǎn)速設(shè)置在20轉(zhuǎn)以下,對于一些如3t3的細胞,初始轉(zhuǎn)速可以考慮以7-10轉(zhuǎn)為起步轉(zhuǎn)速!當然,這和通入的細胞密度等也有很大的關(guān)聯(lián)!
rccs-3d模擬微重力環(huán)境三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)背景介紹?
在20世紀80年代的航天飛行任務(wù)期間,原代細胞培養(yǎng),nasa生命科學(xué)部門對微重力對細胞行為的影響進行了研究。 這項研究的主要目的是分析對生物的失重狀態(tài)的影響,因為在軌道這是正常的環(huán)境。 不幸的是,由于在貨物的預(yù)發(fā)射載荷和軌道飛行階段之間,細胞不處于微重力條件下的事實,結(jié)果是不確定的。 在這些實驗之后,細胞培養(yǎng)污染,科學(xué)家意識到這種在空間上進行的研究是有限的,但它可以在地球上用特殊技術(shù)模擬。 不久,重力歸/令人不安的儀器,如回轉(zhuǎn)器,隨*機(rpm),自由落體機(ffm)和拋物線飛行飛機被開發(fā)。
nasa工程師開發(fā)了在地球上提供“模擬微重力”的旋轉(zhuǎn)壁容器(rwv)生物反應(yīng)器。 裝置的旋轉(zhuǎn)運動抵*重力以將細胞保持在“模擬微重力”環(huán)境中。 在這些條件下,在旋轉(zhuǎn)壁血管內(nèi)生長的細胞聚集在一起形成與3d組織結(jié)構(gòu)相當?shù)?d多細胞結(jié)構(gòu)或團塊,如果不同的細胞類型一起培養(yǎng),甚至更多(7)。 該裝置在1993年工業(yè)生產(chǎn),并且因為許多人已經(jīng)對用rwv獲得的3d培養(yǎng)物進行了重要研究。很快研究不是專門集中在微重力或g力減少,重力矢量方向和超重力也是重力作為重力的增量重要。
細胞是否在rccs生物反應(yīng)器的一個地方停留?
不,細胞和細胞聚集體會在培養(yǎng)基中*浮,這是生物反應(yīng)器中觀察到的高物質(zhì)傳輸?shù)闹匾蛩刂弧?br>.如何保持微重力生物反應(yīng)器里的溫度?
生物反應(yīng)器必須放在恒溫箱里,恒溫箱的溫度可以設(shè)定和維持在37℃。
我如何確保培養(yǎng)所需氧氣?
正如前面提到(問題5),生物反應(yīng)器是放置在恒溫箱里的。根據(jù)培養(yǎng)所需,通過硅樹脂氧合器,恒溫箱中的空氣會擴散入培養(yǎng)皿中。如果有較大的培養(yǎng)容器,有泵可以使恒溫箱的空氣供給滿足培養(yǎng)所需。因為所有的氣體傳輸是通過擴散完成,因而全過程不會產(chǎn)生氣泡和湍流。
培養(yǎng)容器應(yīng)該以什么速度旋轉(zhuǎn)?
這取決于細胞聚合體的直徑。當容器轉(zhuǎn)動時,細胞聚合體加速,直到他們到達沉積速度,而該速度取決于細胞聚合體的大小。根據(jù)斯托克斯方程,沉降速率隨著細胞聚合體半徑的平方而增加。因此,細胞培養(yǎng),隨著聚合體體積上的增加,它們沉降的更迅速,同時為了防止細胞聚合體與培養(yǎng)壁的碰撞有必要增加旋轉(zhuǎn)速度。因此,一開始可能以慢速旋轉(zhuǎn)培養(yǎng),例如7rpm,當細胞聚合體在體積上增長并且變得可見,再增加旋轉(zhuǎn)的速度。
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